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小型猪心肌缺血再灌注模型

一、小型猪心肌缺血再灌注制备方法

(一)实验动物  小型猪,体重(25±5)kg,雌雄不拘。

(二)小型猪急性心肌梗死后无复流模型制作

1.术前准备及麻醉

所有实验小型猪,术前禁食12小时,禁饮4小时,术前洗浴,麻醉,将小型猪移至导管床上,行气管插管,取仰卧位,固定。胸部、腹股沟区及四肢用去毛后,用针电极连接胸部及四肢导联,记录术前心电图、手术过程中同步心电、血压监测。

2.穿刺

麻醉成功后,常规消毒、铺巾,麻醉深达腹股沟韧带下水平。

3.Swan-Ganz漂浮导管置入  

在体外试充盈导管气囊无误后,连接远端压力监测(肺动脉压)接口,在压力波形及透视指导下送入Swan-Ganz漂浮导管,在右心房部位开始充盈气囊,继续送入导管至肺小动脉并形成嵌顿,记录到PCWP,相当于左心室舒张末期压(LVEDP)。释放气囊,实时监测肺动脉压。然后利用温度稀释法测量心排出量(CO)。

4.有创压力监测、记录 

通过Swan-Ganz漂浮导管接有创压力监护系统监测肺动脉压(PAP)和肺动脉楔压(PCWP);将股动脉鞘管侧臂连接有创压力监护系统,连续实时监测股动脉压力。

5.左心室造影  

采用133cm亲水导丝将4F猪尾导管导入左心室,连接高压注射器,采取右前斜位30°,造影剂速度10ml/s,行左心室造影。造影结束后,记录基础情况下的左心室压力曲线,计算舒张末期压力(LVEDP)、收缩末期压力(LVESP)、dp/dt等。记录完毕后撤出导丝和猪尾导管。

6.冠状动脉造影(CAG)  

沿动脉鞘管插入带超滑导丝的4F Judkins右冠状动脉造影管,超滑导丝插入达主动脉根部(冠状动脉窦底),并使之部分反折,然后沿导丝送入造影导管达主动脉根部,头端指向左后方的左冠状动脉开口,然后固定造影导管不动,将导丝轻退至造影导管内约10cm,可见造影导管自行弹入左冠状动脉开口,其标志是导管头端位置固定,且随心脏搏动而搏动

7.指引导管超选择左前降支中段

6F指引导管沿超滑导丝置于左冠开口,更换0.014英寸HiTorque Floppy Ⅱ型导引导丝进入左前降支。依具体情况,一般先选择左前斜加足位,确认导丝进入左前降支。然后改后前位加头位,使导丝进入左前降支远端。再沿导丝导入指引导管到达前降支中段。

8.缺血再灌注

根据左前降支直径选择相应大小球囊,持续闭塞左前降支近段1/3处约45分钟,抽瘪并撤出球囊,恢复血流灌注。

二、模型评价

1.心电图

2.SPECT :SPECT心肌灌注结果:心尖、前臂心尖段、间隔心尖段、侧壁心尖段、前壁中段和基底段,以及前间隔中段和基底段不同程度的血流灌注受损。
3.心脏超声
4.冠脉造影 
5.大动物组织病理(全心大样本切片):模型组心肌间可见局灶性炎细胞浸润(以淋巴细胞和中性粒细胞为主),并伴随心肌外膜炎细胞浸润(以中性粒细胞为主),心肌细胞空泡变性、水肿,部分切片可见心腔内有血栓形成。

小型猪心肌缺血再灌注模型

检测平台

服务项目服务承诺服务周期样本种类
病理切片、免疫组化           染色结果照片2-3周            组织       
Western blotting胶片1-2周蛋白样本或组织        
流式细胞服务散点图、分析数据、设备信息等      1-2周血样、骨髓等  
细胞凋亡检测凋亡图、数据分析
细胞
RT-PCR扩增图1-2周RNA或组织
血压监测(无创式)实时血压数据
大、小鼠

小型猪心肌缺血再灌注模型

该产品被引用文献

宋 健, 赵 磊, 刘挨师. 小型猪心肌缺血模型的构建及应用现状[J]. 中国组织工程研究, 2023, 27(5): 772-778.

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